當前位置:科學網首頁 > 基金首頁 > 新型色譜固定相的合成及應用

國家自然科學基金項目查詢

新型色譜固定相的合成及應用

批準號20975079 學科分類色譜分析 ( B040103 )
項目負責人申燁華 負責人職稱教授 依托單位西北大學
資助金額35.00
萬元
項目類別面上項目 研究期限2010 年 01 月 01 日 至
2012 年 12 月 31 日
中文主題詞多糖類色譜固定相;毛細管柱色譜;蛋白質;純化;復性
英文主題詞Stationary phase;capillary chromatography;proteins;purification;refolding

摘要

中文摘要 研究包涵體蛋白分離、純化與復性的方法對于重組蛋白藥物的發展具有重大的實際意義。液相色譜法是一種有效而理想的蛋白分離純化與復性的方法,疏水色譜作為最常用的色譜復性方法也存在局限性。本項目擬以修飾過的殼聚糖為交聯骨架,采用液氮極冷凝膠化法,在形成微球骨架的同時將N-異丙基丙烯酰胺(PNIPAAm)作為功能化的聚合物同步結合至微球的表面和微孔表面上,合成對環境溫度和pH等具有響應的多孔微球,并探討該多孔微球作為新型色譜固定相對蛋白分離純化與復性的影響。這種多功型色譜填料,可以允許純水或很低濃度的鹽溶液做流動相,具有較高的吸附載量和回收率,有望較好地解決傳統疏水色譜中存在的主要問題。本項目是一項具有潛在應用價值的基礎研究,研究結果將為該類色譜填料的工業化生產提供理論依據。
英文摘要
結題摘要 研究包涵體蛋白分離、純化與復性的方法對于重組蛋白藥物的發展具有重要意義。液相色譜法是一種有效而理想的蛋白分離純化與復性的方法。本項目圍繞新型色譜固定相的制備及應用進行研究,以殼聚糖、葡聚糖、瓊脂糖三類多糖為基質,成功合成2種色譜固定相,應用于標準蛋白、實際樣品的分離;合成了2種用于酶切的毛細管酶反應器和1種用于多肽分離的毛細管開管柱。主要包括:(1) 在以多糖為基質的色譜填料研究中,以葡聚糖為基質,采用液氮極冷法制備可用于蛋白分離的凝膠微球;對瓊脂糖微球進行改性,制備了溫度感應的色譜固定相;開發了一種高濃度的瓊脂糖凝膠微球,可用于多酚小分子的一步分離純化及蛋白質的凝膠過濾和脫鹽,并初步探討分離機理;(2) 以毛細管為載體,制備了一系列在毛細管內壁鍵合功能端基的固定化酶反應器,極大的提高了蛋白質酶切效率;制備的反相毛細管開管柱對多肽具有良好的分離效果;(3) 運用色譜技術,對MMP-13和Tum-5的包涵體的分離、純化及復性進行研究,并對MMPS的抑制機理進行了初步探討。上述研究成果為多糖類色譜固定相和毛細管色譜柱的開發,以及在蛋白質純化復性、多酚小分子的分離純化研究中具有重要意義。

成果

序號 標題 類型 作者
1 新型催化劑對豬油制備生物柴油的研究 期刊 白斌|陳邦|李聰|申燁華|BAI Bin,CHEN Bang,LI Cong,SHEN Ye-hua(Key Laborato|
2 靶向性rhTum-5-NGR包涵體的溶解及親和色譜純化 會議 楊賽娜|王艷|劉萍|李聰|申燁華|張英起|
3 金屬離子對基質金屬蛋白酶的抑制作用 會議 石利利|李聰|惠瑯|申燁華|
4 基質金屬蛋白酶13的色譜純化與復性 會議 申燁華|
5 高濃度瓊脂糖凝膠微球分離純化白藜蘆醇 會議 白斌|趙彥鼎|梁涼|李聰|申燁華|Bin Bai 1,Yan-ding Zhao 2,Liang Liang 1,Cong Li 1,|

關于我們| 網站聲明| 服務條款| 聯系方式| RSS| 中國科學報社 京ICP備14006957 京公網安備110402500057號
Copyright @ 2007- 中國科學報社 All Rights Reserved
地址:北京市海淀區中關村南一條乙三號   電話:010-62580783
夜色网-夜色影院-夜色电影